12月3日晚7:00在北京大学医学部逸夫楼409教室,天根生化科技(北京)有限公司的老师受北医研究生会的邀请,为大家带来了题为“核酸提取及RT-PCR技术”和“从RNA提取到荧光定量PCR解决方案”的专题讲座。相关专业的同学前来参加了本场讲座,教室里座无虚席。
赵丁老师主要介绍了DNA的提取,RNA的提取和RT-PCR。首先,提取核酸的步骤是破碎细胞→提取→纯化,其中提取方法包括沉淀法和介质吸附法。DNA的提取应注意DNA片段长度和DNA产物纯度,提取样本核酸时需注意血液样本、动物组织、口腔拭子的保存和样品的预处理。核酸纯化时注意选择适合的样本起始量以保证样本充分裂解。赵丁老师还对基因组DNA样品纯度不高,基因组DNA获得率不高等常见问题进行了分析。
接下来他介绍了提取RNA的要求,样品的选择原则,如何对样品进行预处理,异硫氰酸胍/酚胍盐和/β-巯基乙醇两种试剂盒提取RNA的操作流程和注意事项。RT反应体系包括模板,逆转录酶和引物,方法分为一步法与两步法,可以根据实验设计选择合适方法。最后赵丁老师向我们介绍了天根公司的RT产品系列和PCR产品系列。
孙博老师为我们讲解了荧光定量PCR的原理、标记方法和解析方法,SYBR法实验流程及注意事项,天根公司荧光定量产品选择指南。他首先解释了荧光定量PCR技术中的常用名词——扩增曲线,荧光阈值和Ct值,阐述了常用荧光标记方法SYBR Green I染料法和Taqman探针法的工作机理,并对这两种方法的优缺点进行了比较。他具体讲解了SYBR法实验流程及注意事项,天根公司荧光定量产品的高效率、高灵敏度、高特异性等优势。
讲座成功解答了研究生在科研中遇到的实际问题,得到了在场同学的一致好评。最后,现场进行了抽奖活动,几位幸运的同学得到了精美礼品。医学部研究生会将继续秉承服务广大研究生学术需求的宗旨,举办系列学术活动,欢迎同学们积极参与。
北京大学医学部研究生会新闻部